影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯(沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音)携手蜘蛛格温(海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音),穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命,迈尔斯誓言打破命运魔咒,找到属于本身的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099(奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音)所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突,一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响!
克里斯·海姆斯沃斯,布莱恩·泰里·亨利,斯嘉丽·约翰逊,科甘-迈克尔·凯,乔恩·哈姆,史蒂夫·布西密,劳伦斯·菲什伯恩,凡妮莎·利古力,乔恩·贝利,杰森·科诺皮索斯,埃文·迈克尔·李,詹姆斯·瑞马尔,小伊萨克·C.辛格尔顿,史蒂夫·布卢姆,钟金妮,乔什·库雷,Dillon Bryan,Misty Lee